10X リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)の作り方、生理食塩水との違い【実験プロトコール】

10X リン酸緩衝液 PBS(-)の作り方

MilliQを800ml準備します。

1. Na₂HPO₄ (dibasic anhydrous)を14.4 g または、Na₂HPO₄ · 2H₂O (dibasic dihydrate) を18.1 gまたは、Na₂HPO₄ · 7H₂O (dibasic heptahydrate)を27.2 g
2. NaClを80g
3. KClを2g
4. KH₂PO₄ (monobasic anhydrous)を2.4 g
5. 上記をMilliQへ入れ、スターラーで混ぜます。

最後に1Lへメスアップします。

必要に応じてオートクレーブまたは0.22uｍのフィルターで濾過します。

1XのPBSにすれば137 mM NaCl, 12 mM Phosphate, 2.7 mM KCl, となります。

pHは1xに希釈した時に7.4へ合わせてください。10xPBSはイオン強度が高いため、10xPBSの時点でpHを7.4に調整すると1xPBSに希釈した時にpHが下がることがあります。

カルシウムとマグネシウムを含まないPBSをPBS(-)と書きます。

10X PBS

cshprotocols.cshlp.org

10X リン酸緩衝液 PBS(+)の作り方

PBS(+)を作る場合は、上記に

CaCl2・H2Oを1.33g

MgCl2・6H2O を1g追加します。

PBS(+)はオートクレーブ滅菌すると沈殿するため、0.22umのフィルターによる滅菌にして下さい。

生理食塩水とPBSの違い

生理食塩水とPBSの違いは何でしょうか？

答えは、成分の違いにより、緩衝作用があるかどうかという点です。

生理食塩水の成分はNaCl、つまりただの塩水で、浸透圧が等張なだけです。

1Lあたり9g、つまり0.9%のNaClが入っています。

PBSの成分はKH₂PO₄（リン酸二水素カリウム）で、その名のPhosphate Buffered SalineのBの部分が一番重要で、緩衝作用が追加されている。

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